신종 코로나바이러스 PCR 검출의 기본 과정
1. 표본 수집: RT-PCR에 의한 nCoV 검출을 위한 상부 호흡기(비인두 및 구인두 포함) 및 하부 호흡기(가래, 기관 흡인물 또는 기관지폐포 세척액 포함) 샘플의 동시 수집. 하기도 샘플을 쉽게 구할 수 있는 경우: 샘플 수집을 위해 적절한 PPE를 사용합니다(비말 및 노출 예방을 위한 URT 샘플 및 공기 중 예방을 위한 LRT 샘플 참고) URT 샘플을 수집할 때 바이러스 샘플링 면봉(면 대신 멸균 폴리 에스테르 또는 레이온)을 사용합니다. 및 바이러스 수송 매체. 콧구멍이나 편도선에서 검체를 채취하지 마십시오. nCoV가 의심되는 환자, 특히 폐렴 또는 중증 환자의 경우 단일 URT 검체로 진단을 배제할 수 없으므로 URT 및 LRT 검체를 증량하는 것이 좋습니다.
2. 핵산 추출: 핵산 추출 기기 또는 수동 핵산 추출
1), 기구가 필요 없고 수동 추출 사용
핵산 추출 및 시료 분리에 필요한 장비 및 실험실 소모품:
생물학적 안전 캐비닛(기능: 시료 분리, 인력 제공, 시료 및 환경 보호),
탁상용 고속냉동원심분리기(기능: 속도 12000RPM 이상, 핵산분석 등),
저온냉장고(기능:시약보관),
금속욕조, 피펫(기능:정확한 투여),
멸균된 원심분리관(기능: 핵산 등의 분리),
라텍스장갑(기능:오염방지),
절대 에탄올, 이소프로판올, DNase 및 RNase가 없는 물(DEPC로 처리되지 않은 물).
3. 자동 핵산 추출 장비: (자동 추출, 26분에 한 번 32개 샘플 추출 가능)
일치하는 사전 설치된 플레이트는 기계에 직접 로드 및 추출됩니다.
4. 형광 정량적 PCR 검출:
필수 장비 및 소모품: 생물학적 안전 캐비닛(기능: 샘플 준비, 인력 제공, 샘플 및 환경 보호),
형광 정량 PCR 기기(기능: PCR 증폭 검출 및 분석),
탁상용 고속 냉장 원심 분리기(기능: 속도 12000RPM 이상),
저온 냉동고({0}}도에서 시료 보관, -20도 및 4도에서 시약 보관),
오실레이터, (믹스)
단계적 파이펫 팁(기능: 정확한 로딩), 1-10ul 크기
멸균된 원심분리기 튜브(0.5/1.5/2ml),
0.2ml 광학 등급 PCR 튜브/플레이트(기능: PCR 반응 튜브),
라텍스 장갑(기능: 오염 방지).
핵산 추출, 반응 시스템 구성 및 결과 해석은 키트 지침에 따릅니다.