일꾼이 일을 잘하려면 먼저 연장을 갈고 닦아야 한다는 속담이 있다. 만족스러운 PCR 실험 결과를 얻기 위해서는 소모품의 선택이 매우 중요합니다. PCR 결과를 분석할 때 프라이머, 효소 농도, 온도 및 시간 분석에 중점을 두는 경우가 많지만 PCR 소모품도 영향 요인 중 하나라는 사실을 간과하고 있습니다. PCR 소모품의 종류가 많은데 올바른 PCR 소모품을 선택하는 방법은 무엇입니까? 다음은 답을 찾는 데 도움이 되는 몇 가지 질문입니다.
PCR 소모품
1. 왜 PCR 소모품은 일반적으로 PP로 만들어지나요?
일반 PCR이든 실시간 형광 정량 PCR(qPCR)이든 일반적으로 소모품은 시약이나 샘플과 직접 접촉하므로 생산 및 준비 과정에서 고품질 재료와 우수한 처리 기술이 필요합니다. 일반 소모품은 폴리프로필렌(PP)으로 만들어집니다. 폴리프로필렌(PP)은 생물학적으로 불활성인 재료로 표면이 생체 분자에 쉽게 부착되지 않으며 내화학성과 내열성이 우수합니다.
2. 부피가 다른 PCR 튜브/플레이트를 선택하는 방법은 무엇입니까?
PCR 튜브/플레이트의 공통 용량:
• 단일 튜브/{0}}튜브/12-튜브: 0.5mL, 0.2mL, 0.1mL
• {{0}}웰 플레이트: 0.2mL, 0.1mL
• {{0}}웰 플레이트: 0.02mL
PCR 튜브/플레이트 사양:
특정 실험 요구 사항에 따라 적절한 제품을 선택합니다. 대부분의 PCR 튜브의 부피는 PCR 반응의 요구 사항을 충족할 수 있습니다. 용량 사양은 표준 용량과 저용량이 있습니다. 일반적으로 저용량 튜브를 먼저 선택하는 것이 좋습니다. 저용량 반응기 튜브/플레이트는 헤드룸이 적기 때문에 열 전달이 개선되고 증발이 감소합니다. 동시에 샘플을 추가할 때 너무 많거나 적은 샘플을 추가하지 않도록 해야 합니다. 너무 많으면 열전도율 감소, 유출 및 교차 오염이 발생할 수 있고 너무 적으면 샘플 증발 손실이 발생할 수 있습니다.
3. 단일 튜브 또는 8-열 튜브의 평면 덮개/볼록 덮개의 차이점은 무엇입니까?
샘플 양이 적은 경우 단일 튜브 또는 {{0}}튜브 튜브가 선호됩니다. 그러나 반응 부피 요구 사항이 크면 단일 튜브가 우세하며 부피는 0.5mL에 도달할 수 있습니다. 편평한 덮개와 볼록한 덮개가 있는 8-튜브 튜브와 단일 튜브의 두 가지 유형이 있으며 각각 고유한 장점이 있습니다. 플랫 캡은 qPCR을 위한 정확한 형광 신호 전달을 제공합니다. 마커에 쓰기 쉽습니다. 볼록한 덮개는 압력으로 인한 튜브 변형을 줄이기 위해 PCR 기기 덮개와 접촉합니다. 그러나 형광 신호의 전송에 영향을 미치며 qPCR 실험에 적용할 수 없습니다.
4. 다양한 96-웰 플레이트 사용 시나리오의 차이점은 무엇입니까?
96-웰 플레이트는 일반적으로 스커트가 없는 플레이트, 세미 스커트 플레이트 및 풀 스커트 플레이트로 나뉩니다.
스커트리스 플레이트: 대부분의 열 순환기 또는 qPCR 기계와 호환되지만 자동화된 애플리케이션에는 적합하지 않습니다. 피펫팅 과정에서 안정성이 높지 않으며 플레이트 홀더와 함께 사용해야 합니다.
세미 스커트 플레이트: 라벨 부착 또는 바코드 적용, 자동 적용이 가능하며 피펫팅 안정성이 우수합니다.
풀 스커트 플레이트: 자동화된 실험실 응용 분야에 매우 적합하지만 라벨 및 바코드 응용 분야에도 적합합니다. 우수한 기계적 강도, 돌출 모듈이 있는 PCR 기계에 적합, 피펫팅 중 높은 안정성.
5. PCR plate/tube 재질이 더 두껍고 안정적입니까?
아니요. PCR 소모품은 일관된 열 전달을 제공하기 위해 균일한 벽 두께를 가져야 합니다. 초박형 튜브 벽은 표준 버전보다 50% 더 얇아 열 장벽을 더욱 줄여 더 빠르고 더 나은 응답을 제공합니다.
6. 96-웰 또는 384-웰 플레이트의 경우 잘린 모서리와 라벨이 동일하지 않은 이유는 무엇입니까?
모서리 절단: PCR 플레이트의 모서리 절단 위치 선택은 쉬운 위치 지정을 위해 적응된 기기의 요구 사항에 따라 다릅니다.
식별: PCR 플레이트의 영숫자 표시는 개별 웰과 샘플 위치를 식별하는 데 도움이 됩니다. 일반적으로 양각된 색상 번호 로고 또는 새겨진 로고입니다. 일부 자동화된 응용 실험의 경우 각인된 마크가 있는 반응 플레이트가 더 잘 밀봉됩니다.
7. 일부 PCR 플레이트 웰이 돌출되어 있는 반면 다른 웰은 평평합니다. 어느 것이 더 낫습니까?
적합한 것이 좋습니다. 일반적인 PCR 플레이트에는 두 가지 유형이 있습니다. 평평한 웰 가장자리와 돌출된 웰 가장자리입니다. 대부분의 써멀 사이클러에 적합한 평평한 웰 에지가 있는 반응 플레이트. 라이저 구멍의 가장자리에 있는 반응판은 밀봉에 편리하여 샘플 간의 교차 오염 위험을 줄일 수 있습니다.
8. 다양한 색상의 PCR 튜브/플레이트를 선택하는 방법은 무엇입니까?
일반적인 PCR 반응의 경우 투명한 것을 사용할 수 있습니다. Real-Time PCR 반응에서 흰색 튜브의 감도와 일관성이 상대적으로 더 높습니다. 흰색 튜브 벽은 형광이 튜브 벽을 통과하고 굴절되는 것을 방지하여 형광이 가열 모듈로 전달되거나 모듈에 의해 흡수되거나 일관되지 않게 반사되는 것을 방지합니다. 투명 튜브에 비해 흰색 튜브 상단에서 더 강력하고 집중된 형광 신호를 수집할 수 있습니다.
