혈청 병의 적용
혈청 병은 저 추출 붕규산 유리로 만들어졌으며 무색 투명한 병은 USP 유형 I 및 ASTM E 438 유형 I 표준 클래스 A의 요구 사항을 충족합니다. 20 분 동안 121도에서 고압 멸균 할 수 있으며 125ml로 나눌 수 있습니다. , 250ml, 500ml, 1L, 2L 용량에 따라
세럼병은 일반적으로 PET 소재를 사출 스트레치 블로잉(Injection Stretch Blowing) 공법으로 만든 세럼을 보관하는 용기입니다. 배지는 세포 성장에 필요한 영양소입니다. 출처에 따라 합성배지와 천연배지로 나뉘며, 둘 다 혈청병에 보관할 수 있다.
세럼 병
천연 배지:
가장 일반적으로 사용되는 천연 배지는 혈청, 기본적으로 송아지 혈청입니다. 혈청에는 다양한 세포 성장 인자, 부착 촉진 인자 및 이들의 다중 활성 물질이 포함되어 있습니다. 합성 배지와 결합하면 세포가 원활하게 증식하고 성장할 수 있습니다. 혈청은 -5도 ~ -20도의 특수 혈청 병에 보관해야 합니다.
합성 매체:
합성배지는 세포가 필요로 하는 물질의 종류와 양에 따라 엄격하게 배합됩니다. 실험 조건의 제어를 용이하게 하는 많은 유형과 알려진 구성 요소가 있습니다. 탄수화물, 아미노산, 지질, 무기염, 비타민, 미량 원소 및 세포 성장 인자를 포함합니다. 그러나 천연 매질에 비해 일부 천연 미지의 성분은 알려진 화학 성분으로 대체될 수 없습니다. 따라서 세포 배양에 사용되는 기본 합성 배지 역시 합성 배양을 극복하기 위해 일정량의 천연 배지 성분을 첨가해야 한다. 불충분한 베이스, 가장 일반적인 관행은 송아지 혈청을 추가하는 것입니다.
혈청 병의 모양은 정사각형이며 파악하기 쉽고 대부분의 산 및 알칼리 부식에 강하며 취화 온도는 -70도이며 여전히 -30도에서 특정 인성을 가지고 있습니다. 천연 배지이든 합성 배양액이든 좋은 포장 용기입니다. 혈청 병에 보관할 수 있습니다.
인간 제대혈 내피 전구 세포의 분리, 배양 및 동정 및 개선된 동결-해동 방법에 의한 무세포 혈관 지지체 구축
인간 제대혈에서 분리 및 배양된 내피 전구 세포의 가능성 및 임상 적용 가치를 탐색합니다.
방법: 벵부 의과대학 제1부속병원 산부인과에서 만년제왕절개 수술을 받은 태아의 제대혈을 채취하여 50U/ml 헤파린이 들어있는 혈청병에 담았습니다. 무균 조건에서 4도 아이스박스에 보관하고 세포로 운반 배양실에서 밀도구배 원심분리를 통해 제대혈 단핵구를 얻었다. 얻어진 단핵구를 두 부분으로 나누고, 소태아혈청 M199 배지(FCS-M199)와 자가혈청 M199 배지(AS-M199)를 첨가하였다. 그리고 그것들을 인간 피브로넥틴(HFN)이 있거나 없는 배양 접시에 파종했습니다(각각 F({11}}), F(1), A(0), A(1)로 표시됨). 시험관내 유도, 분화 및 확장을 수행하였다.
전체 유도 및 분화 과정에서 부착 세포의 형태적 변화가 관찰되었으며, 면역조직화학, 면역형광 및 유세포분석과 같은 관련 기술과 결합된 다양한 각도에서 확인되었습니다.
결과: 배양 12일 후, 제대혈 단핵 세포가 부착되기 시작했습니다. 3d 이후부터는 방추형이 나타나기 시작하여 유착세포의 수가 점차 증가하여 점차 방추형이 되었다. 1주일까지 배양하면 중심에 방추세포를 중심으로 원형의 세포가 있는 전형적인 콜로니가 형성된다. 세포를 14일 동안 배양하면 상호 연결된 세포 클러스터가 점차 연결되어 네트워크와 같은 구조를 형성했습니다. 동시에 배양시간이 지속적으로 증가함에 따라 장방추세포도 점차 짧아지기 시작하여 전형적인 포석과 같은 변화를 보였다.
부착 세포를 1주일 동안 배양한 결과, 인간 피브로넥틴이 포함된 배지에서 인간 피브로넥틴이 포함되지 않은 배지에서 세포 수가 유의하게 더 많았고 두 가지 상이한 배지에서 세포 수에 유의한 변화가 없는 것으로 관찰되었다.
